Organoid Kit | Art.No. | Components | Specification | Art.No. |
小鼠結腸 | MA-0817H007L | 小鼠結腸類器官基礎培養基 | 500mL | MG2204-MC-A500 |
小鼠結腸類器官培養因子B (50x) | 10mL | MG2204-MC-B500 | ||
小鼠結腸類器官培養因子C (250x) | 2mL | MG2204-MC-C500 | ||
小鼠結腸類器官培養因子D (250x) | 2mL | MG2204-MC-D500 | ||
EDTA (0.5 M, pH 8.0) | 2mL | E21912 | ||
MA-0817H007S | 小鼠結腸類器官基礎培養基 | 100mL | MG2204-MC-A100 | |
小鼠結腸類器官培養因子B (50x) | 2mL | MG2204-MC-B100 | ||
小鼠結腸類器官培養因子C (250x) | 0.4mL | MG2204-MC-C100 | ||
小鼠結腸類器官培養因子D (250x) | 0.4mL | MG2204-MC-D100 | ||
EDTA (0.5 M, pH 8.0) | 1mL | E21911 |
產品信息
其他自備材料和試劑
MG&ABW基質膠
上皮類器官基礎培養基
類器官消化液
潤洗液
類器官冷凍保存培養基(無血清)
DPBS (1X),液體,不含鈣和鎂
小鼠結腸類器官complete medium培養基的制備
使用無菌操作技術配制小鼠結腸類器官的擴增或分化培養基。以配制 10 mL 為例配置小鼠結腸類器官擴增或分化培養基,
如所需量不同,可相應調整用量。
1. 冰上解凍 Mouse Colonic Organoid Supplement B (50x),Mouse Colonic Organoid Supplement C (250x)和 Mouse
Colonic Organoid Supplement D (250x)。
2. 注意:各 Supplement 添加物解凍后,建議分別分裝后保存取用,避免反復凍融。
3. 小鼠結腸類器官的擴增培養基:將 200 uL Mouse Colonic Organoid Supplement B (50x),40 μL Mouse Colonic
Organoid Supplement C (250x) 和 40 μL Mouse Colonic Organoid Supplement D (250x) 加 至 9.72 mL Mouse
Colonic Organoid Basal Medium 中,充分混合,配制成 10 mL 小鼠結腸類器官擴增培養基。
4. 小鼠結腸類器官的分化培養基:將 200 μL Mouse Colonic Organoid Supplement B (50x),40 μL Mouse Colonic
Organoid Supplement C (250x) 加至 9.76 mL Mouse Colonic Organoid Basal Medium 中,充分混合,配制成 10 mL
小鼠結腸類器官分化培養基。
5. 注意:配制后的小鼠結腸類器官擴增或分化培養基可在 2 - 8°C 儲存 10 天。此外,Mouse Colonic Organoid
Supplement B(50x)內含有細菌及真菌抗生素(50x)。
8. 將接種完成后的培養板至于 37℃二氧化碳恒溫培養箱中,孵育 15 min 左右待基質膠凝固后取出。
9. 配制小鼠結腸類器官擴增培養基。
10. 待基質膠凝固后,沿孔壁加入提前預熱的小鼠結腸類器官擴增培養基,24 孔板每孔 500 μL。
11. 將 24 孔板置于 37℃二氧化碳培養箱中培養,待新長出的類器官直徑超過 100 μm 后可進行分化實驗。
12. 分化前需要吸去 24 孔板培養孔中的小鼠結腸類器官擴增培養基,并加入 500 μL 提前配制的分化培養基,分化
通常需要 4 d 以上時間,分化期間每隔 2 d 更換一次分化培養基,分化完成后可進行后續實驗。