類器官用基質膠在4°C條件下為液態,但在加熱到37°C時呈凝膠狀態?;|膠凝固后,重新放回4°C過 夜,基質膠可再次液化。(小提示:基質膠液化,建議將基質膠放4°C 冰箱的冰盒里,保持溫度穩定,基質膠液化完)。適用于類器官生長、分化、代謝和毒理學研究,體內和體外血管生成實驗和免疫缺陷小鼠成瘤實驗。
類器官(organoids)是一種利用具有干性潛能的細胞體外培養出的3D細胞培養物。由于與對應的器官擁有高度相似的組織學特征,具有自我更新和自我組織能力,并能重現該器官的部分生理功能,因此類器官可作為多種疾病的體外模型,在干細胞與發育、再生醫學、疾病研究、藥物開發和精準醫療等多個方面擁有廣泛的應用前景。類器官在體外培養時,由于周期較長,培養過程中注意事項較多,操作較為繁瑣,在操作過程中難免會遇到些許"疑難雜癥"導致實驗失敗。
如何選擇構建類器官的來源細胞?
答:理論上所有類器官都可以選擇從ESC/IPSC來構建,部分類器官可以選擇從組織中分離成體干細胞來構建,成體干細胞來源的類器官其構建周期短,體外傳代次數多,相對而言構建成本低;根據實驗需求,如果要通過類器官模型來研究器官的發育,需要對起始細胞進行基因編輯,一般都是通過ESC/IPSC來構建類器官。
注意事項:
類器官用基質膠在溫度高于10°C時就會開始凝固成膠,所以盡量在冰上操作基質膠。類器官 傳代時,如果為了避免酶對類器官造成影響,可直接用4°C預冷的基礎培養基對基質 膠進行緩慢吹打,即可將類器官從基質膠中釋放出來。